Aiuto mi date una mano informazioni muffe o no?

[marcoepiera]

https://ibb.co/74QtGLk questo è la nuova glave box ho messo plexiglas davanti Azzo adesso vedo bene
Ti metto foto vasetti niente di buono niente micelio
https://ibb.co/gPNChgf
Il. Vasetto piccolo e quello che ti dicevo sono per me l'ideale
https://ibb.co/XF1WsKX
https://ibb.co/dKQqxzN
https://ibb.co/1Tsdy5L
https://ibb.co/4ZYjxg8.

[marcoepiera]

Glave box con plexiglas https://ibb.co/8r8HB88

[marcoepiera]

[quote=marcoepiera post_id=95776 time=1587553989 user_id=questo è la nuova glave box ho messo plexiglas davanti Azzo adesso vedo bene
Ti metto foto vasetti niente di buono niente micelio
https://ibb.co/gPNChgf
Il. Vasetto piccolo e quello che ti dicevo sono per me l'ideale
https://ibb.co/XF1WsKX
https://ibb.co/dKQqxzN
https://ibb.co/1Tsdy5L
https://ibb.co/4ZYjxg8.
[/quote]

[marcoepiera]

Voglio fare una. Prova una parte dei vasetti li sterilizzi nella. Pentola a. Pressione un'altra. Nel. Forno ok nel forno a che temperatura? E per quanto tempo? Sempre. Con il tappo un po' svitato e sopra. La. Stagnola? Giusto?

[asklepios]

Ciao!
Molto bella la SAB, in effetti il pannello di plexiglass aiuta molto con la visibilità. Vedo che ci stai prendendo la mano, sono contento.

I vasetti sono perfetti, mi sembra di vedere del micelio in quasi tutti. Il micelio è quella specie di lanugine bianca che comincia a svilupparsi sopra e intorno al pezzo di fungo. Di un vasetto mi hai mandato la foto dall'alto senza coperchio, sappi che una volta che li apri al di fuori della SAB sono da buttare a causa dei batteri presenti nell'aria.

Le foto hanno una risoluzione pessima, è dovuta alla scarsità di luce. Fai le foto alla luce del sole oppure con una luce molto forte appena sopra quello che devi fotografare. Le fotocamere di tablet e cellulari, soprattutto se non molto moderne, hanno difficoltà in condizioni di bassa illuminazione. Vedrai che la risoluzione alla luce del sole migliorerà tantissimo e saprò dirti con più certezza.

Nel forno a 230 gradi per un'ora e mezza dovrebbe essere sufficiente per sterilizzare. Tieni presente che se metti i vasetti in forno non puoi metterci già dentro l'agar come nella pentola a pressione perché evaporerebbe. Se decidi di sterilizzare i vasetti in forno devi necessariamente sterilizzarli da vuoti e sterilizzare l'agar in una bottiglia separata all'interno della pentola a pressione, per poi versarlo nei vasetti sterili all'interno della SAB. Un processo sicuramente un po' più lungo. Non so se sia necessario svitare il tappo, non ho mai avuto occasione di sterilizzare bottiglie o vasetti vuoti nel forno (io uso le piastre di Petri), al massimo tienilo svitato per sicurezza. La stagnola ci va in ogni caso e serve a evitare che la bocca dei vasetti si contamini all'apertura del forno e al trasferimento all'interno della SAB.

[marcoepiera]

Ciao le sto facendo col tablet che non è vecchio ha un anno di vita e le faccio a 5 pixel come risoluzione si effettivamente in garage non c'è molta luce c'è il neon le farò alla. Luce solare si sono preso adesso ho comprato anche il saldatore per scaldare il coltellino anzi ho preso un coltello e ne ho fatto un coltellino tipo bisturi più maneggevole e diventa bello rosso si mi sta prendendo anche se cavolo pensavo di riuscirci cioè come soddisfazione mi bastava un vasetto buono.... Ma mi sa che manco uno è buono domani se vuoi ti faccio le foto alla. Luce solare così vedi cosa c'è si ho aperto un vasetto perché mi sembra muffa e non micelio...

[asklepios]

Ti garantisco che per quello che posso vedere hai micelio buono in quasi tutti i vasetti, se domani mi mandi delle foto migliori ti saprò dire con certezza. Non aprire anche gli altri per ora, perché mi sembra siano buoni

[marcoepiera]

Ecco ti mando foto https://ibb.co/HCfL8mS1
https://ibb.co/dKDF4S62
https://ibb.co/mzcdcG13
https://ibb.co/0mhKGxC4
https://ibb.co/bJ3fX6S5
https://ibb.co/0mhKGxC
https://ibb.co/rmN8nmS6
https://ibb.co/FJg50DY
https://ibb.co/6gP7D6Y

[asklepios]

Hai cancellato le foto? Non riesco ad aprirne neanche una

[marcoepiera]

Ok riprovo non le ho numerate ma ho fatto na cagata ok ricarico pardom

https://ibb.co/HCfL8mS
https://ibb.co/dKDF4S6
https://ibb.co/mzcdcG1
https://ibb.co/0mhKGxC
https://ibb.co/bJ3fX6S
https://ibb.co/FJg50DY
https://ibb.co/rmN8nmS
https://ibb.co/6gP7D6Y

[asklepios]

Scusa, c'era un problema con la mia connessione internet, adesso le vedo tutte. Le numero io:

#1 https://ibb.co/HCfL8mS
#2 https://ibb.co/dKDF4S6
#3 https://ibb.co/mzcdcG1
#4 https://ibb.co/0mhKGxC
#5 https://ibb.co/bJ3fX6S
#6 https://ibb.co/FJg50DY
#7 https://ibb.co/rmN8nmS
#8 https://ibb.co/6gP7D6Y

#1 Mi sembra appena fatta, bisogna aspettare ancora un po' per poter dire con certezza.
#2 Micelio. Il punto nero potrebbe essere qualche residuo carbonizzato presente sul coltello oppure qualche muffa.
#3 Micelio in abbondanza.
#4 Micelio.
#5 Sembra fatta da poco, bisogna aspettare che diventi come la 3 o la 4.
#6 C'è del micelio che spunta, ma anche tanti batteri. Quella pozzanghera di acqua opaca che non si muove sono batteri.
#7 Giovane, bisogna aspettare.
#8 Foto molto poco dettagliata, non saprei dirti con certezza. Vedo del bianco, che è positivo, ma non ti so dire

Adesso che hai ottenuto del micelio, anche se non del tutto pulito (qualche batterio qua e là), è il momento di pulirlo. Per fare questo preleva dei piccoli triangolini di agar dalle zone dove cresce solo il micelio utilizzando un coltello o bisturi sterilizzato sulla fiamma e trasferiscili al centro di nuovi vasetti di agar vergini. Fai tutto all'interno della SAB, l'obbiettivo finale è avere dei vasetti che abbiano al loro interno solo quella lanugine bianca che è il micelio. Se non hai abbastanza vasetti puoi buttare via quelli chiaramente contaminati come il 6, annusali prima di buttarli così ti fai un'idea di come riconoscere un contaminante. Se invece annuserai i vasetti come il 3 o 4 dopo aver fatto il trasferimento e prima di buttarli ti renderai conto della differenza.
Se torni indietro nei vecchi post ti avevo allegato una pagina con dei video che illustrano il processo di trasferimento. Un ultimo consiglio è di usare un po' meno agar nei vasetti, perché se ne usi troppo è difficile prelevarne dei piccoli pezzi. Meno di mezzo centimetro è lo spessore ideale per lavorare.

[marcoepiera]

Uaoooo quindi ci siamo riusciti????? Uaoooo lo devo fare velocemente o devo aspettare che il micelio si espanda? No nessun problema di vasetti ne ho altri quindi faccio stessa procedura per sterilizzare l'agar mettendolo nei vasetti ma ne devo mettere di meno ho capito bene?

[asklepios]

Congratulazioni! Io aspetterei che il micelio si avvicini quasi a toccare i bordi del vasetto prima di fare il trasferimento. Sì ti consiglio di usare un po' meno agar, quando farai i trasferimenti te ne renderai conto perché sarà difficile. Dato che non hai moltissimi vasetti che trasferirai ti consiglio di fare una prova o due, magari usando il vasetto 6 che tanto è da buttare oppure gli altri vasetti vuoti che hai. E' importante non passare con le mani sopra al vasetto, quindi devi aprirlo all'interno della SAB, inclinarlo ed entrare solo con il coltello arroventato. Ricordati di non infilzare il triangolino dopo averlo tagliato ma di sollevarlo solamente, altrimenti non riuscirai a staccarlo dalla punta senza fare un macello. Quando avrai un paio di vasetti con il micelio isolato potrai passare al prossimo passo, che è l'inoculazione del substrato oppure la coltura liquida, a seconda del caso. Ti consiglio di fare almeno due trasferimenti prima per assicurarti che il micelio sia pulito.

[marcoepiera]

E grazie a al tuo grande aiuto una domanda io posso preparare anticipatamente dei vasetti di petri con dentro agar in modo che preparo una volta una quantità maggiore e mi faccio la scorta? Se si la devo conservare in frigo? O basta metterla al fresco garage cantina?
Ti mando foto numerate scusami
https://ibb.co/Jx6XYHZ
https://ibb.co/j88rf7m
https://ibb.co/phFg9R2 questo è micelio e si vede bene
https://ibb.co/BKSN67M
https://ibb.co/BPjRmjk
https://ibb.co/jzGpWm6

https://ibb.co/xL0ddLk

[marcoepiera]

Cioè ho messo i numerini sulle foto vasetti perché faccio confusione puoi ricontrollare li? Così ne vengo fuori ho capito quando si fanno foto bisogna numerarli

[asklepios]

Ho visto e in effetti avevi mandato inizialmente due foto dello stesso vasetto quindi l'avevo numerato due volte. In ogni caso il 6 che era quello contaminato corrisponde, quindi nessun problema. In quanto a preparare prima vasetti, non saprei dirti, è una domanda che mi hanno già fatto. Io non facendo agar spessissimo, passa comunque minimo una settimana tra una sessione e l'altra, mi trovo meglio a fare le Petri volta per volta. Puoi provare a chiudere bene i vasetti, sigillare il bordo con della pellicola e a conservarli in frigorifero.

[marcoepiera]

Ok quindi è solo il vasetto 6 da scartare? Gli altri sono buoni? Ma devo aspettare qualche giorno giusto?

[asklepios]

Direi di sì. Io aspetterei finché il micelio si avvicina ai bordi del barattolo, ci vorrà probabilmente un settimana, magari un po' meno

[marcoepiera]

Adesso capisco perché poco agar nel vasetto e perché vanno meglio barattolino bassi dato che bisogna prendere il micelio e trasferirlo in un altro vasetto quindi più basso e più riesci a lavorare adesso ho trovato del barattoli di vetro che tengono il tonno Azzo sono belle basse non come il. Petri ma quasi costa un botto il tonno però sono veramente ideali caspita ma allora con petri puoi fare parecchio micelio senza riclonare il. Fungo?
Se devo prende solo un triangolino in un vasetto ci saranno almeno 10 triangolino quindi posso fare altri 10 vasetti?

[marcoepiera]

Comunque ho capito che la cosa. Molto importante è la fiamma. Per scaldare sterilizzare il. Coltellino Azzo in internet fanno vedere delle. Cose non vere con alcol noooo serve quelle a gas obbligatorio